PCR實驗室的壓差設置對于防止交叉污染至關重要。通常,PCR實驗室分為四個區域:試劑配制區、樣品處理區、核酸擴增區、產物分析區。這些區域應保持相對獨立,不能互通,且需遵循嚴格的單向流程,即只能從試劑配制區到樣品處理區,再到核酸擴增區,最后到產物分析區。
壓差設置上,一般遵循以下原則:
· 試劑配制區:設為微正壓區域,通常設定為正壓,如+15Pa,以防止外部空氣進入造成污染。
· 樣品處理區:同樣設為微正壓區域,但壓力略低于試劑配制區,如+10Pa或+5Pa,以防止含核酸的氣溶膠從試劑配制區進入。
· 核酸擴增區與產物分析區:設為微負壓區域,如-5Pa至-20Pa,以防止含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。
緩沖間的壓差設置也至關重要,以確保實驗室內外空氣的有效隔離。常見的緩沖間壓差設置方式包括:
· 所有緩沖間相對于區域房間內外,自身保持正壓或負壓狀態。
· 緩沖間與實驗區保持一致的壓力梯度。